NY/T４４５４—２０２５
水稻耐冷性鉴定技术规程
１　范围
本文件确立了水稻耐冷性鉴定程序,规定了发芽期、芽期、幼苗期、孕穗期和开花期耐冷性鉴定过程中
样品准备、种子浸种、种子催芽、育苗移栽、低温处理、鉴定指标调查、耐冷性分级与判定等阶段的有关要
求,描述了上述阶段的操作过程记录、标记等追溯方法.
本文件适用于亚洲栽培稻(Oryzasativa L?)的耐冷性鉴定.
２　规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件.
３　术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
３?１
相对发芽率　relativegerminationpercentage
同一品种低温处理下种子发芽率与对照处理下种子发芽率的百分比.
３?２
死苗率　deadseedlingpercentage
死苗数占供试出芽种子粒数的百分比.
３?３
叶赤枯度　leafredblightdegree
鉴定种质幼苗期受低温冷害后,叶片呈黄化、干枯或幼苗死亡的等级描述.
３?４
空壳率　emptygrainpercentage
稻穗的空瘪粒数占总粒数的百分比.
３?５
耐冷级别　coldtolerancegrade
鉴定种质耐冷程度的等级描述.
４　发芽期耐冷性鉴定
４?１　样品准备
４?１?１　对照品种
采用以下对照品种或已知耐冷水稻种质作为耐冷对照.
耐冷对照品种:松粳１６、延粳２８、铁粳６号、昆明小白谷.
４?１?２　种子准备
每份鉴定种质和对照品种精选成熟饱满的种子５００粒,不包衣或拌种.
４?２　仪器与试剂
４?２?１　仪器及器具
恒温烘箱、光照培养箱、直径９cm 培养皿、９cm 定性滤纸、镊子.
４?２?２　试剂
２?５％ NaClO(v/v)消毒液、蒸馏水.
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４?３　鉴定步骤
４?３?１　种子浸种
将鉴定种质和对照品种的种子置于５０℃恒温烘箱处理４８h.每份材料随机挑选饱满无霉点种子５０
粒,置于垫双层滤纸的１个培养皿中,培养皿上标注鉴定种质编号,设３次重复.用２?５％ NaClO(v/v)消
毒液处理３０min,用蒸馏水清洗３次~４次.加入适量蒸馏水,浸没种子;在常温下浸种２４h后,再用蒸
馏水洗涤２次~３次.
４?３?２　低温处理
在浸种后的培养皿里加入１５mL蒸馏水,盖好皿盖,置于昼１０h/夜１４h、昼光照１０００lx的１４℃光
照培养箱内,进行低温处理.每天更换等体积蒸馏水１次.
４?３?３　对照处理
在浸种后的培养皿里加入１５mL蒸馏水,盖好皿盖,置于昼１０h/夜１４h、昼光照１０００lx的３０℃光
照培养箱内催芽.每天更换等体积蒸馏水１次.
４?３?４　发芽粒数调查
低温处理和对照处理１４d后,调查种子发芽粒数.以芽长达种子长度的一半,根长达种子长度为发
芽标准,调查记载发芽种子粒数.
４?３?５　发芽率计算
种子发芽率按公式(１)计算:
G＝N GN
NTN×１００????????????????? (１)
式中:
G ———发芽率的数值,单位为百分号(％);
NG—N—— 种子发芽粒数的数值;
NT—N—— 供试的种子总粒数的数值.
４?３?６　相对发芽率计算
根据低温处理和对照处理下检测的发芽率,按公式(２)计算相对发芽率:
RG＝GLT
GCK×１００????????????????? (２)
式中:
RG ———相对发芽率的数值,单位为百分号(％);
GLT ———低温处理下发芽率的数值,单位为百分号(％);
GCK ———对照处理下发芽率的数值,单位为百分号(％).
５　芽期耐冷性鉴定
５?１　样品准备
５?１?１　对照品种
耐冷对照品种:松粳１６、延粳２８、铁粳６号、昆明小白谷.
５?１?２　种子准备
同４?１?２.
５?２　仪器与试剂
同４?２.
５?３　鉴定步骤
５?３?１　种子催芽
将鉴定种质和对照品种的种子置于５０ ℃恒温烘箱处理４８h.每份材料随机挑选饱满无霉点种子
１００粒,置于垫双层滤纸的１个培养皿中,培养皿上标注鉴定种质编号,设３次重复.用２?５％ NaClO(v/
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v)消毒液处理３０min,蒸馏水清洗３次~４次.加入适量蒸馏水,浸没种子;在常温下浸种２４h后,再用
蒸馏水洗涤２次~３次.盖好皿盖,在设置为无光照条件的３０℃~３２℃培养箱内催芽１d~３d,当芽长达
到约５mm 时从培养箱取出.
５?３?２　挑选发芽种子
从培养箱取出培养皿,用蒸馏水洗涤１次~２次.从发芽的种子中挑选芽长约５mm 的种子５０粒,
置于原培养皿,加入适量水,使水深达到种子厚度的一半,盖好皿盖.
５?３?３　低温处理
将放好发芽种子的培养皿置于昼１４h/夜１０h、昼光照３０００lx的５℃光照培养箱内,低温处理１０d.
５?４　死苗数调查
低温处理结束后,从光照培养箱中取出培养皿.用蒸馏水洗涤２次~３次后,置于温度２５ ℃左右有
阳光的室内或温室,使其恢复生长.每天更换１次水.恢复生长７d~１０d后,调查死苗数.
５?５　死苗率计算
按公式(３)计算死苗率:
DR＝N DS
NTN×１００????????????????? (３)
式中:
DR ———死苗率的数值,单位为百分号(％);
N DS———死苗数的数值;
N TN———供试的发芽种子总粒数的数值.
６　幼苗期耐冷性鉴定
６?１　样品准备
６?１?１　对照品种
松粳１６、吉粳８１、中花８号、昆明小白谷.
６?１?２　种子准备
同４?１?２.
６?２　仪器设施及试剂
６?２?１　仪器设施
人工气候箱、光照培养箱、恒温冷水池、温室、塑料大棚.
６?２?２　试验器具及试剂
育苗盘(６０cm ×３０cm ×３cm)、营养土、２?５％ NaClO (v/v)消毒液.
６?３　鉴定步骤
６?３?１　播种育秧
种子经消毒、浸种和催芽,将发芽种子播种于装有床土的育苗盘中;育苗盘上标注鉴定种质编号.每
个材料播１５粒~２０粒,以行距５cm、株距２cm 进行点播.设３次重复.在能够使秧苗正常生长的温室、
塑料大棚育苗.
６?３?２　低温处理
在３叶~４叶龄期,将试验秧苗置于昼１４h/夜１０h、昼光照３０００lx的１０℃人工气候箱,低温处理７
d;或置于１２℃恒温冷水池(水深５cm),低温处理１０d.
６?４　叶赤枯度调查
低温处理结束后,将鉴定种质秧苗移至２５℃左右的温室,使其恢复生长.７d~１０d后,调查记载幼
苗的叶赤枯度.
７　孕穗期耐冷性鉴定
７?１　样品准备
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７?１?１　耐冷对照品种
松粳１６、龙粳３１、吉粳８１、铁粳６号、丽粳９号、昆明小白谷.
７?１?２　种子准备
同４?１?２.
７?２　仪器设施及试剂
７?２?１　仪器设施
人工气候箱、人工气候室、恒温冷水池、恒温冷水灌溉鉴定圃.
７?２?２　器具及试剂
育苗盘(６０cm ×３０cm ×３cm)、营养土、２?５％ NaClO (v/v)消毒液、塑料桶、钵、标牌、标签、剪子.
７?３　短期低温处理鉴定
７?３?１　育苗移栽
种子经消毒、浸种和催芽,将发芽种子播在装有床土的育苗盘进行育秧;育苗盘上标注鉴定种质编
号.在３叶~４叶龄期,把秧苗移栽到装有营养土的塑料桶或钵里,每个桶或钵里栽６穴,每穴１株,并
插标牌标注种质编号.每份鉴定种质栽５桶或钵.在水稻生长过程中,每个单株保留１个主茎或分蘖
茎,其余剪掉.
７?３?２　低温处理
在减数分裂期即当剑叶与倒二叶的叶枕距为－４cm~２cm 时进行低温处理.处理前挑选水稻茎的
叶枕距处于－４cm~２cm 的３个桶或钵挂标签标记,标注低温处理起始日期.上午８:００将鉴定植株置
于昼１４h/夜１０h、昼光照３０００lx的１６ ℃人工气候箱低温处理７d;或置于１６ ℃恒温冷水池(水深
３０cm),低温处理７d.
７?３?３　空瘪粒数调查
低温处理结束后,将鉴定植株移至能够使水稻正常生长的温室或室外,成熟后调查挂标签的稻穗空瘪
粒数.以穗部露出剑叶鞘外３cm 时作为抽穗标准,记载挂标签植株的抽穗期,并计算低温处理起始至抽
穗的历时时间.历时９d~１３d的稻穗空瘪粒数均视为有效数据;历时小于９d或大于１３d的稻穗空瘪
粒数均视为无效数据.随机挑选低温处理视为有效的１０个稻穗,调查每穗空瘪粒数和每穗总粒数,计算
其平均值.
７?３?４　空壳率计算
按公式(４)计算空壳率:
ER＝SUN
STN×１００????????????????? (４)
式中:
ER ———空壳率的数值,单位为百分号(％);
SUN ———每穗空瘪粒数的数值;
STN ———每穗总粒数的数值.
７?４　恒温深冷水灌溉鉴定
７?４?１　育苗移栽
经种子消毒、浸种和催芽,将发芽种子播在装有床土的育苗盘进行育苗;育苗盘上标注鉴定种质编号.
在３叶~４叶龄期将秧苗移栽到冷水灌溉鉴定圃,插上标注鉴定种质编号的插地牌.按２５cm × １２cm
或当地生产上采用的栽植密度移栽.每份种质栽２行,每行１０穴,每穴１株.设３次重复.
７?４?２　低温处理
从水稻早熟品种的幼穗分化开始(幼穗长度达１?５mm 时),用１９℃冷水低温处理至晚熟品种齐穗为
止,约处理４０d.保持冷水恒温和流动,水深保持２０cm~２５cm.若鉴定种质间生育期差异大,则按生育
期分组,分别种植于不同冷水灌溉鉴定圃进行处理.每１０份~２０份种质设１个对照品种.
７?４?３　空瘪粒数调查
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冷水灌溉处理结束后,恢复为水稻生产田的水管理.完熟期每份种质每行两端各去掉２株后,随机选
取１０株的主穗,调查每穗空瘪粒数和每穗总粒数,计算其平均值.
７?４?４　空壳率计算
空壳率的计算方法同公式(４).
８　开花期耐冷性鉴定
８?１　样品准备
８?１?１　耐冷对照品种
同７?１?１.
８?１?２　种子准备
同４?１?２.
８?２　仪器设备及试剂
８?２?１　仪器设备
人工气候箱、人工气候室
８?２?２　试验器具及试剂
同７?２?２
８?３　鉴定步骤
８?３?１　育苗移栽
同７?３?１.
８?３?２　低温处理
在低温处理前一天傍晚或当日早晨,将要低温处理的稻穗挂标签,标注低温处理起始日期,并剪掉已
开过花的颖花.低温处理当日上午８:００将鉴定植株置于昼１４h/夜１０h、昼光照３０００lx的１７℃人工气
候箱,低温处理５d.处理期间每天调换鉴定植株在人工气候箱或人工气候室内的位置.
８?３?３　空瘪粒数调查
低温处理结束后,将栽有鉴定植株的桶或钵移至能够使水稻正常生长的温室或室外,并剪掉未开花的
穗基部颖花.成熟后调查挂标签的稻穗空瘪粒数.每份种质调查１０个稻穗的空瘪粒数,计算其平均值.
８?３?４　空壳率计算
空壳率的计算方法同公式(４).
９　分级与判定规则
９?１　耐冷性级别
１级:极强(HT,highlytolerant).３级:强(T,tolerant).５级:中等(MT,moderatelytolerant).７
级:弱(S,susceptible).９级:极弱(HS,highlysusceptible).
９?２　发芽期耐冷性判定
水稻发芽期耐冷性判定见表１.
表１　水稻发芽期耐冷性判定
耐冷级别,级相对发芽率(RG),％ 耐冷性
１ ８０?０≤RG≤１００?０ 极强(HT)
３ ６０?０≤RG＜８０?０ 强(T)
５ ４０?０≤RG＜６０?０ 中(MT)
７ ２０?０≤RG＜４０?０ 弱(S)
９ ０≤RG＜２０?０ 极弱(HS)
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９?３　芽期耐冷性判定
水稻芽期耐冷性判定见表２.
表２　水稻芽期耐冷性判定
耐冷级别,级死苗率(DR),％ 耐冷性
１ DR ＝０ 极强(HT)
３ ０＜DR≤３０?０ 强(T)
５ ３０?０＜DR≤５０?０ 中(MT)
７ ５０?０＜DR≤８０?０ 弱(S)
９ ８０?０＜DR≤１００?０ 极弱(HS)
９?４　幼苗期耐冷性判定
水稻幼苗期耐冷性判定见表３.
表３　水稻幼苗期耐冷性判定
耐冷级别,级幼苗表型症状耐冷性
１ 所有叶青绿或接近青绿极强(HT)
３ 小于或等于３０％叶尖脱色或黄化强(T)
５ 大于３０％叶黄化或小于５０％叶干枯中(MT)
７ ５０％~９０％叶干枯弱(S)
９ ９０％以上叶枯死极弱(HS)
９?５　孕穗期耐冷性判定
水稻孕穗期耐冷性判定见表４.
表４　水稻孕穗期耐冷性判定
耐冷级别,级空壳率(ER),％ 耐冷性
１ ER≤２０?０ 极强(HT)
３ ２０?０＜ER≤４０?０ 强(T)
５ ４０?０＜ER≤６０?０ 中(MT)
７ ６０?０＜ER≤９０?０ 弱(S)
９ ９０?０＜ER≤１００?０ 极弱(HS)
９?６　开花期耐冷性判定
水稻开花期耐冷性判定见表５.
表５　水稻开花期耐冷性判定
耐冷级别,级空壳率(ER),％ 耐冷性
１ ER≤２０?０ 极强(HT)
３ ２０?０＜ER≤４０?０ 强(T)
５ ４０?０＜ER≤６０?０ 中(MT)
７ ６０?０＜ER≤９０?０ 弱(S)
９ ９０?０＜ER≤１００?０ 极弱(HS)
１０　水稻耐冷性鉴定程序的构成
水稻耐冷性鉴定程序包括样品准备、种子浸种、种子催芽、育苗移栽、低温处理、鉴定指标调查、耐冷性
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分级与判定等,其鉴定流程图如１所示.
图１　水稻耐冷性鉴定流程
１１　追溯方法
１１?１　标记方法
短期低温处理鉴定阶段(见７?３)标记如下内容:符合低温处理的植株(见７?３?２)、低温处理种质每个
稻穗的抽穗期(见７?３?３)、标记的植株或稻穗的编号、做标记的人员姓名、标记时间等.
１１?２　鉴定过程记录
１１?２?１　文字记录
在执行水稻耐冷性鉴定程序指示过程中,记录如下内容:执行各个阶段鉴定程序指示的人员姓名、鉴
定时间、鉴定地点、执行的具体操作内容、鉴定结果、观察到的症状或现象等.
１１?２?２　影像记录
在执行水稻耐冷性鉴定程序指示过程中,拍照或录像记录如下情景:各阶段的鉴定试验现场,低温处
理后不同鉴定时期的发芽种子、幼苗、稻穗等组织或器官的表型症状.
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