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以下是中华人民共和国农业行业标准 NY/T 4481-2025《棉花棉蚜抗性室内鉴定技术规程》 的详细内容总结:
一、范围 - 适用于棉花材料 苗期 对棉蚜(Aphis gossypii)抗性的室内鉴定。
- 规定了材料准备、鉴定程序、抗性评价、记录及材料处理方法。
二、规范性引用文件 - GB 4407.1《经济作物种子 第1部分:纤维类》:规范棉花种子质量要求。
三、术语定义 - 死亡率:死亡棉蚜数占总供试蚜虫数的百分比。
- 单头产蚜量:每头棉蚜一个世代产生的若蚜数量(核心评价指标)。
- 抗棉蚜性:棉花减轻或抵御棉蚜危害的可遗传性状程度。
四、材料准备1. 植物材料 - 供试材料:待鉴定棉花品种(系),种子需符合 GB 4407.1 质量要求。
- 感蚜对照:非洲E40(单头产蚜量 >30 头)。
- 培育条件:
- 人工气候室:温度 25–28℃、湿度 60–80%、光周期 16h光照:8h黑暗。
- 确保棉苗无病虫害。
2. 棉蚜来源 - 实验室长期饲养或田间采集后室内繁殖 ≥3代,未接触化学农药。
- 饲养条件:温度 (24±1)℃、湿度 50%±10%、光周期 16h:8h。
五、鉴定程序1. 样品采集 - 棉苗长至 2–4片完全展开叶 时,取顶部嫩叶。
2. 样品处理 - 叶片平铺于含 琼脂培养基 的培养皿,叶柄插入培养基保湿。
- 每 2–3天 更换同材料新鲜叶片。
3. 接虫操作 - 每培养皿接 5–8头无翅成蚜,24小时后移除成蚜,保留 5头初孵若蚜 作为初始试虫。
- 重复设计:每材料 ≥3次重复,每次重复 10个培养皿(共50头若蚜)。
4. 培养条件 - 温度 (24±1)℃、湿度 50%±10%、光周期 16h:8h。
5. 调查记录 - 从若蚜发育为成蚜并产卵开始,每日记录:
- 结束条件:所有初始试虫死亡。
六、抗性评价1. 结果计算 - 死亡率(第6天):
M = /frac{n}{N} /times 100/% (n:死虫数;N:接虫数) - 单头产蚜量:
X = /frac{/sum_{i=1}^{10} X_i}{50} (Xi:每皿总产蚜量;50:10皿总接虫数) - 数据要求:保留1位小数,取平均值。
2. 试验有效性 - 感蚜对照需同时满足:
- 第6天死亡率 <20%;
- 单头产蚜量 >30头。
否则试验无效,需重做。 3. 抗性等级划分 | 抗性水平 | 单头产蚜量(X) | | 高抗(HR) | X ≤ 10 | | 抗(R) | 10 < X ≤ 20 | | 中抗(MR) | 20 < X ≤ 30 | | 感(S) | 30 < X ≤ 40 | | 高感(HS) | X > 40 | 4. 鉴定报告 - 基于3次重复结果确定抗性水平,按 附录A 填写记录表并编写报告。
七、过程记录 - 标记内容:
- 操作记录:
- 人员、时间、地点、环境参数(温湿度)、操作内容及结果。
- 使用 附录A 表格详细记录每日存活蚜数和产蚜量。
八、鉴定后处理 - 蚜虫处理:
- 移除的成蚜和若蚜置于 -20℃冰箱 灭活。
- 棉花处理:
- 供试棉苗、感蚜对照及鉴定用叶片需 高温高压灭活。
附录A:鉴定结果记录表 - 记录 每日存活蚜数 和 产若蚜量,按重复和培养皿编号逐日填写。
- 包含温度、操作人员、审核信息等字段(详见表A.1模板)。
核心要点总结 - 评价核心:以 单头产蚜量 为唯一抗性分级指标。
- 关键控制:
- 感蚜对照必须符合有效性标准(死亡率<20%、产蚜量>30头)。
- 环境参数(温湿度、光照)需严格稳定。
- 操作规范:
- 标准化接虫量(50头/材料)、叶片更换频率(2–3天)。
- 数据记录完整可追溯。
- 安全性:鉴定后材料需灭活处理,防止生物污染。
此标准为棉花抗棉蚜育种和品种评价提供了可重复、标准化的室内鉴定方法。
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